發布時間：所屬分類：醫學職稱論文瀏覽：1次
摘 要： 論文摘要：隨著人們生活方式的改變和診斷水平的提高，我國前列腺癌發病率呈上升趨勢。臨床上通常采用血清前列腺特異性抗原(PSA)檢測和穿刺活檢病理檢查進行確診，但對早期微小病灶的預測能力較弱，因此需要一個新的分子標志物來對早期前列腺癌進行早期診斷是
論文摘要：隨著人們生活方式的改變和診斷水平的提高，我國前列腺癌發病率呈上升趨勢。臨床上通常采用血清前列腺特異性抗原(PSA)檢測和穿刺活檢病理檢查進行確診，但對早期微小病灶的預測能力較弱，因此需要一個新的分子標志物來對早期前列腺癌進行早期診斷是目前研究的熱點和重點。
關鍵詞：前列腺癌,蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子,生物學指標
引言
探討蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)在前列腺癌中的表達及意義。 方法 選取昆明醫科大學第三附屬醫院2009年1月～2012年4月手術治療的前列腺癌患者65例為試驗組，選取同期昆明醫科大學第三附屬醫院收治的良性前列腺增生患者65例組織標本為對照組，采用免疫印跡(Western blot)的方法對兩組CIP2A的表達情況進行比較，并分析CIP2A的表達與臨床病理因素的關系。 結果 CIP2A在試驗組中的陽性表達率為64.62%(42/65)，在對照組中陽性表達率為29.23%(19/65)，兩組進行比較，差異有統計學意義(P < 0.05);所有患者隨訪1年，CIP2A的陽性表達與術后1年腫瘤轉移復發、分化程度、臨床分期、術前血清中PSA水平有關(P < 0.05)。 結論 CIP2A有望成為前列腺癌早期診斷、預測復發轉移及預后評價的一個重要的生物學指標。
前列腺癌是威脅男性健康的一種常見的泌尿生殖系統腫瘤[1]。有資料顯示，前列腺癌在歐美國家的發病率較高，約為124.8/10萬，我國為1.6/10萬，本研究旨在探討蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)在前列腺癌組織中的表達情況及其與臨床病理之間的關系，現報道如下：
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇昆明醫科大學第三附屬醫院2009年1月～2012年4月手術治療的前列腺癌患者65例作為試驗組，年齡51～79歲，平均(63.8±6.2)歲，其中42例患者標本來自經尿道前列腺電切術，23例患者經穿刺活檢病理證實后行恥骨上前列腺癌根治術;所有患者均未進行放化療及激素和外科去勢治療。選取同期昆明醫科大學第三附屬醫院治療的良性前列腺增生患者65例的組織標本作為對照組，年齡52～83歲，平均(63.1±5.8)歲，所有標本是由經尿道前列腺電切術獲得;獲取后標本于15 min內-80℃的冰箱內保存。標本的分離和使用都分別通過醫院倫理審查委員會的批準。
1.2 方法
65例前列腺癌標本均采用免疫印跡(Western blot)法進行CIP2A的測定，取前列腺癌組織勻漿，加入裂解液孵育4℃，10 min。以12 000 r/min，4℃，離心10 min，取上清。將蛋白上清溶于5×SDS上樣緩沖液，95℃，水浴10 min，各取上清30 μg進行10% SDS-PAGE電泳。電泳結束后用濕轉法將樣品轉移至PVDF膜。將PVDF膜放入含有5% BSA的TBS/T中，4℃包被過夜�？贵w孵育。將膜置于ECL顯色液中，室溫避光孵育1 min。壓片、曝光、顯影。實驗中設不加一抗的空白對照組，實驗重復5次。以α-Tubulin作為內參。圖像以GS800 Calibrated Densitometer 掃描儀進行灰度掃描。所有標本常規制作HE染色。HE染色后由2名病理科醫師共同閱片進行Gleason分級。按照分化程度分為5級即Gleason分級(1～5)分，將腫瘤細胞的主要成分和次要成分別記分，高分化為2～4分，中分化5～6分，亞低分化7分，低分化為8～10分。所有患者入院后抽取血樣本，采用免疫熒光法進行測定PSA，并對所有患者通過門診復查進行隨訪1年。
1.3 臨床分期標準
根據Whitmore-Jewett分期標準進行分期：A期：患者無臨床癥狀，僅通過病理檢查發現癌細胞;B期：腫瘤限于前列腺內，伴有臨床表現;C期：腫瘤穿透前列腺被膜;D期：出現前列腺癌轉移。
1.4 觀察指標
采用半定量方法判讀免疫組織化學染色結果。陽性結果為分布于細胞質、細胞膜以及核周的比較鮮明的棕黃色著色，陰性結果為均一、非特異的較淺的著色。每張切片隨機選取10個高倍視野(400×)，每個視野計數100個細胞，判斷陽性細胞的染色強度和計數陽性細胞的百分率。染色強度評分如下：0分為無染色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為棕褐色;陽性細胞百分率評分如下：1分為≤10%，2分為>10%～30%，3分為>30%～50%，4分為>50%。最終染色結果取兩者乘積：0分為陰性(-);1～2分為弱陽性(+);3～4分為中等陽性(++);>4分為強陽性(+++)。
1.5 統計學方法
采用統計軟件SPSS 18.0對數據進行分析，正態分布計量資料以均數±標準差(x±s)表示。計數資料以率表示，采用χ2檢驗。以P < 0.05為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 CIP2A在試驗組和對照組中的表達情況
CIP2A在試驗組中的陽性表達率為64.62%(42/65)，在對照組中的陽性表達率為29.23%(19/65)，兩組進行比較，差異有統計學意義(χ2=16.3388，P < 0.05)。見表1。
表1 CIP2A在試驗組和對照組中的表達情況(例)
注：CIP2A：蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子
2.2 前列腺癌組織中CIP2A的表達與臨床病理因素的關系
所有患者隨訪1年，根據患者年齡、術后1年腫瘤轉移復發、分化程度、臨床分期、術前血清中PSA水平進行分析，CIP2A的陽性表達與術后1年腫瘤轉移復發、分化程度、臨床分期、術前血清中PSA水平有關，差異均有統計學意義(P < 0.05)。見表2。
表2 前列腺癌組織中CIP2A的表達與臨床病理因素的關系(例)
注：PSA：前列腺特異性抗原;CIP2A：蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子
3 討論
前列腺癌的發生是一個長期的多步驟多因素的變化過程，是細胞增殖與細胞死亡相互作用的結果，一旦細胞過度增殖可能導致腫瘤的發生，細胞凋亡受抑制能增強惡性病發生的可能性。
最近研究表明[4-5]，CIP2A是新發現的一種致癌因子，它可以干擾抑癌因子蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A，PP2A)，導致人體細胞無節制地增殖。CIP2A蛋白主要位于人類腫瘤細胞的細胞質。目前研究顯示CIP2A基因定位于染色體3q13.13，DNA長度約為38.8 kb，mRNA長為4284 bp，含有21個外顯子，有一個編碼905個氨基酸的開放讀碼框(ORF)，蛋白質相對分子質量為102 kD，其確切結構仍未被充分認識[6-7]。但已證實其在多種惡性腫瘤中均高表達如乳腺癌、食管癌、胃癌、肝癌、非小細胞肺癌等惡性腫瘤中呈高表達。在多種人良性組織樣本中低表達，如結腸、胸腺、脾、子宮、胎盤、甲狀腺等[8-9]。
本研究結果顯示，CIP2A在前列腺癌中的陽性表達率為64.62%(42/65)，明顯高于在良性前列腺增生的陽性率表達29.23%(19/65)，進一步探討CIP2A的表達與患者年齡、術后1年腫瘤轉移復發、分化程度、臨床分期、術前血清中PSA水平的關系，結果顯示CIP2A的陽性表達與術后1年腫瘤轉移復發、分化程度、臨床分期、術前血清中PSA水平有關。分化越低，分期越晚，CIP2A的陽性表達率越高。與相關研究結果一致[10-12]。
本研究還顯示，通過對血清中不同水平PSA值患者的CIP2A水平進行分析，PSA≥10 ng/mL患者的CIP2A的陽性表達明顯高于<10 ng/mL患者的陽性率。PSA仍然是目前診斷前列腺癌的主要標志物之一，正常男性血清中PSA<4 ng/mL，當血清PSA>10 ng/mL則高度懷疑患有前列腺癌[13-14]。在此之間往往提示需要進行穿刺活檢，二者聯合檢查能為前列腺癌患者提供更敏感而特異的診斷工具。
綜上所述，CIP2A有望成為前列腺癌早期診斷、預測復發轉移及預后評價的一個重要的生物學指標。聯合檢測血清中PSA水平更有助為前列腺癌的早期診治提供依據，為前列腺癌的臨床治療提供新思路。
參考文獻
[1] 王剛剛，李玉瑭，宋坤堯，等.CIP2A相關分子生物學機制的研究進展[J].生理科學進展，2012，43(2)：141-144.
[2] Yu HC，Chen HJ，Chang YL，et al. Inhibition of cip2a determines erlotinib-induced apoptosis in hepatocellular carcinoma [J]. Biochem Pharmacol，2013，85(3)：356-366.
[3] Yu G，Liu G，Dong J，et al. Clinical implications of cip2a protein expression in breast cancer [J]. Med Oncol，2013， 30(2)：524.
[4] 陳淼，周凱.CIP2A與惡性腫瘤的關系及其表達調控的研究進展[J].南昌大學學報：醫學版，2012，52(5)：91-95.
[5] 伍耿青，鄒曉峰.CIP2A與腫瘤關系的研究進展[J].贛南醫學院學報，2012，32(6)：968-970.
[6] 楊雪，宋濤，楊威，等.CIP2A在肝癌組織中的表達及其臨床意義[J].西安交通大學學報：醫學版，2011，32(4)：477-480.
[7] Yi F，Ni W，Liu W，et al. Expression and biological role of cip2a in human astrocytoma [J]. Mol Med Rep，2013，7(5)：1376-1380.
[8] Xue Y，Wu G，Wang X，et al. Cip2A is a predictor of survival and a novel therapeutic target in bladder urothelial cell carcinoma [J]. Med Oncol，2013，30(1)：406.
[9] 游經宏，周凱，黃品助，等.CIP2A在肝細胞癌中的表達及其臨床意義[J].中華肝膽外科雜志，2011，17(3)：248-252.
[10] 張恒，楊超，余振華，等.膠質母細胞瘤中蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子的表達及對細胞增殖的影響[J].中華顯微外科雜志，2010，33(5)：395-396.
[11] 顧海風，夏國偉.CIP2A在惡性腫瘤中的表達及作用的研究進展[J].中華臨床醫師雜志：電子版，2011，05(12)：3560-3563.
[12] Xu P，Xu XL，Huang Q，et al. Cip2a with survivin protein expressions in human non-small-cell lung cancer correlates with prognosis [J]. Med Oncol，2012，29(3)：1643-1647.
[13] 李偉，張華東，李自強，等.VEGF、HIF-1α在不同前列腺病變組織中的表達及臨床意義[J].解放軍醫藥雜志，2012，24(5)：11-13.
[14] 王金行，王月，劉柏新，等.血清PSA、FPSA/TPSA與ACP聯合檢測對前列腺癌診斷的意義[J].現代腫瘤醫學，2012，20(5)：999-1001.
