發(fā)布時(shí)間：2020-02-22所屬分類：醫(yī)學(xué)論文瀏覽：1次
摘 要： 摘要背景：研究表明Asxl1的缺失可導(dǎo)致骨質(zhì)發(fā)育不全、骨質(zhì)缺損類疾病的發(fā)生，但目前在根尖周炎環(huán)境下該因子與骨破壞之間的關(guān)系暫無相關(guān)報(bào)道。目的：探討炎性微環(huán)境下Asxl1對成骨細(xì)胞增殖分化的影響。方法：實(shí)驗(yàn)選用脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞建立體外炎性微環(huán)境
摘要背景：研究表明Asxl1的缺失可導(dǎo)致骨質(zhì)發(fā)育不全、骨質(zhì)缺損類疾病的發(fā)生，但目前在根尖周炎環(huán)境下該因子與骨破壞之間的關(guān)系暫無相關(guān)報(bào)道。目的：探討炎性微環(huán)境下Asxl1對成骨細(xì)胞增殖分化的影響。方法：實(shí)驗(yàn)選用脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞建立體外炎性微環(huán)境，通過CCK-8實(shí)驗(yàn)篩取脂多糖最佳質(zhì)量濃度和最佳作用時(shí)間，然后用20mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞24h，免疫熒光檢測Asxl1的蛋白表達(dá)水平，RealTime-PCR檢測Asxl1mRNA的表達(dá)水平。為進(jìn)一步驗(yàn)證Asxl1基因在炎性微環(huán)境中影響成骨細(xì)胞的增殖與分化，脂多糖刺激形成炎性微環(huán)境后轉(zhuǎn)染Asxl1-SiRNA24h，采用CCK-8檢測細(xì)胞增殖活性，RealTime-PCR檢測Asxl1及成骨相關(guān)基因ALP和RUNX2mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果與結(jié)論：①脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞后，Asxl1蛋白和mRNA表達(dá)水平呈降低趨勢;②脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞后，轉(zhuǎn)染Asxl1-SiRNA24h，細(xì)胞增殖活性下降趨勢明顯，Asxl1基因及成骨相關(guān)基因ALP和RUNX2mRNA的表達(dá)水平明顯降低;③結(jié)果提示，Asxl1可能通過參與炎性反應(yīng)過程，影響成骨細(xì)胞的增殖與分化，進(jìn)而參與骨破壞進(jìn)程。
關(guān)鍵詞：MC3T3-E1細(xì)胞;Asxl1;根尖周炎;骨破壞;基因轉(zhuǎn)染;脂多糖;成骨分化;國家自然科學(xué)基金
0引言Introduction
根尖周炎是發(fā)生于牙根尖周軟硬組織的破壞性疾病，多繼發(fā)于牙髓病及根尖周圍組織其他炎性疾病。當(dāng)根尖周炎癥處于慢性進(jìn)展期時(shí)，其炎癥反應(yīng)過程受機(jī)體全身狀態(tài)的影響。牙髓病長期不治療或經(jīng)根管治療不徹底，根管內(nèi)存在大量感染性物質(zhì)或病原微生物，導(dǎo)致根管內(nèi)炎癥遞質(zhì)、細(xì)胞因子和相關(guān)酶釋放，激活大量炎癥細(xì)胞，從而引發(fā)根尖周炎[1-3]，其主要臨床表現(xiàn)為肉芽組織的形成和牙槽骨骨質(zhì)的破壞[4-6]。骨質(zhì)破壞即骨形成的動(dòng)態(tài)偶聯(lián)過程遭到破壞，此時(shí)成骨細(xì)胞形成新骨的能力弱于破骨細(xì)胞吸收舊骨的能力，骨穩(wěn)態(tài)平衡被打破[7]。已知炎癥微環(huán)境可通過抑制成骨細(xì)胞的增殖與分化，從而破壞正常的骨偶聯(lián)過程，導(dǎo)致骨質(zhì)破壞[8]。慢性根尖周炎造成的骨破壞，即當(dāng)根尖周圍組織處于炎性微環(huán)境時(shí)，宿主通過對炎癥微生物及其感染物質(zhì)作出的免疫反應(yīng)。針對炎癥反應(yīng)造成的骨穩(wěn)態(tài)失衡機(jī)制較復(fù)雜，仍然有待進(jìn)一步研究。
脂多糖是大多數(shù)革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要脂質(zhì)成分，其包含3個(gè)結(jié)構(gòu)：脂質(zhì)A、核心寡糖和可變多糖(O抗原)[9-10]。脂多糖可在細(xì)菌細(xì)胞分裂或死亡過程中釋放，形成細(xì)胞內(nèi)毒素，導(dǎo)致單核細(xì)胞和吞噬細(xì)胞產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，引起炎癥發(fā)生[11]。因而，脂多糖常被廣泛用于誘導(dǎo)炎癥環(huán)境發(fā)生的分子機(jī)制研究[12]。
Asxl1被發(fā)現(xiàn)存在于染色體上，編碼核蛋白，對基因表達(dá)穩(wěn)定性的維持起主要作用。該基因表達(dá)于所有的造血細(xì)胞，且在其他多種組織中也存在廣泛表達(dá)[13-14]。Asxl1基因突變體最早發(fā)現(xiàn)于骨髓樣惡性腫瘤患者中，如急性髓系白血病、骨髓增生異常綜合征等疾病，因此，眾多學(xué)者主要研究方向?yàn)樵摶蚺c髓系疾病之間的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Asxl1基因突變體存在于多種髓系腫瘤患者的造血細(xì)胞中，往往預(yù)后不良[15-17]。但近期有研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)該基因可影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化，同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)Asxl1基因缺失會(huì)誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遠(yuǎn)離成骨分化[18]，導(dǎo)致骨偶聯(lián)失衡即破壞骨穩(wěn)態(tài)，因此Asxl1基因與骨破壞之間也存在一定的關(guān)系。為了近一步研究Asxl1與骨破壞之間的關(guān)系，以及該基因在根尖周炎環(huán)境下與骨破壞的關(guān)系，該實(shí)驗(yàn)選取小鼠胚胎成骨前體細(xì)胞MC3T3-E1作為研究對象，用脂多糖刺激細(xì)胞模擬體外炎性微環(huán)境，探討Asxl1基因在炎癥環(huán)境下對成骨前體細(xì)胞的作用，從而為根尖周病骨破壞的防治提供可能的靶向基因。
1材料和方法Materialsandmethods
1.1設(shè)計(jì)體外實(shí)驗(yàn)研究觀察。
1.2時(shí)間及地點(diǎn)2017至2019年在大連醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室完成。
1.3材料
1.3.1實(shí)驗(yàn)細(xì)胞小鼠胚胎成骨前體細(xì)胞(MC3T3-E1)購于上海素爾生物科技有限公司。
1.3.2實(shí)驗(yàn)儀器和試劑低溫離心機(jī)、二氧化碳培養(yǎng)箱(Thermo);超凈工作臺(tái)(Boxun);顯微照相系統(tǒng)(OLYMPUS);酶標(biāo)儀、反轉(zhuǎn)錄儀(BIO-RAD);PCR儀(TaKaRa);α-MEM培養(yǎng)基(Hyclone);胎牛血清、胰蛋白酶(Gibco);CCK-8(東仁化學(xué)科技有限公司);總RNA提取試劑盒(生物工程股份有限公司);反轉(zhuǎn)錄試劑盒(TaKaRa);TBGreenTMPremixExTaqTMⅡ(TaKaRa);Asxl1-SiRNA、NegativeControl(NC)(蘇州吉瑪基因);XfectTMRNATransfectionReagent(TaKaRa)。
1.4實(shí)驗(yàn)方法
1.4.1細(xì)胞培養(yǎng)以5×105每孔的密度將小鼠胚胎成骨前體細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞接種于T25透氣培養(yǎng)瓶中，用體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清、1%雙抗的α-MEM培養(yǎng)液對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，置于37℃、體積分?jǐn)?shù)為5%CO2孵箱中孵育，隔天換液，待細(xì)胞長滿至80%左右，胰酶消化，進(jìn)行傳代，取狀態(tài)好的細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
1.4.2CCK-8檢測細(xì)胞增殖情況將MC3T3-E1細(xì)胞以每孔2000個(gè)的密度接種于96孔板中，分別加入0，1，10，20，50mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞24h，以篩取最佳作用質(zhì)量濃度，加入0，20mg/L脂多糖分別刺激0，24，48h，以篩取最佳作用時(shí)間。按1∶9(CCK-8溶液∶α-MEM培養(yǎng)基)的比例配置混合溶液，每孔總量100μL(加液時(shí)應(yīng)將液體緊貼孔壁緩慢注入，此過程是為了避免加液過程中氣泡的產(chǎn)生，從而防止對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成誤差)，37℃、體積分?jǐn)?shù)為5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1h，測定吸光度值。
1.4.3免疫熒光檢測Asxl1蛋白表達(dá)將第3代MC3T3-E1細(xì)胞以2×106的密度接種于培養(yǎng)皿，待細(xì)胞貼壁并長至細(xì)胞與細(xì)胞接觸且無重疊時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，用0，20mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞24h，棄原培養(yǎng)液，PBS清洗3遍，每次5min，40g/L多聚甲醛固定約20min，PBS清洗，0.25%Triton破膜20min，PBS清洗，封閉液封閉20min，一抗(Asxl1PolyclonalAntiboby)4℃過夜，PBS清洗，二抗(山羊抗兔IgG/TRITC)常溫避光孵育1h，PBS清洗，DAPI染色8min，PBS清洗去除多余染料，防淬滅封固劑封固，熒光顯微鏡觀察。
1.4.4RealTime-PCR檢測Asxl1mRNA表達(dá)將第3代MC3T3-E1細(xì)胞以1×106的密度接種于6孔板，待細(xì)胞長至80%左右，用0，20mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞24h，根據(jù)RNA提取試劑盒說明書提取RNA，操作時(shí)應(yīng)注意無菌，以免RNA降解或污染，以該RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄為cDNA用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)所有引物均由寶生物工程有限公司(TaKaRa公司)代為合成，以GAPDH作為內(nèi)參引物，序列見表1。
1.4.5基因轉(zhuǎn)染①實(shí)驗(yàn)組：Asxl1-SiRNA和轉(zhuǎn)染試劑的混合液(5μLAsxl1-SiRNA+95μLXfect+100μL轉(zhuǎn)染試劑);②陰性對照組：空載對照和轉(zhuǎn)染試劑的混合液(5μL空載對照+95μLXfect+100μL轉(zhuǎn)染試劑);③空白對照組：僅含有轉(zhuǎn)染試劑(100μL轉(zhuǎn)染試劑)。將第3代MC3T3-E1細(xì)胞以每孔1×105的密度接種于6孔板中，先用20mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞24h，棄原培養(yǎng)液，每孔加1mLα-MEM培養(yǎng)基饑餓培養(yǎng)，配置轉(zhuǎn)染試劑，靜置15min后，加入相應(yīng)孔內(nèi);6-8h后換正常培養(yǎng)液，24h后提取樣本。按上述CCK-8法檢測在脂多糖炎性微環(huán)境中沉默Asxl1基因后MC3T3-E1細(xì)胞增殖活性，RealTime-PCR檢測Asxl1及成骨相關(guān)因子ALP和RUNX2mRNA表達(dá)水平變化。
1.5主要觀察指標(biāo)①M(fèi)C3T3-E1細(xì)胞處于脂多糖介導(dǎo)的炎性微環(huán)境中，Asxl1基因和蛋白的表達(dá)水平;②MC3T3-E1細(xì)胞在炎性微環(huán)境中沉默Asxl1基因后，細(xì)胞增殖活性和成骨相關(guān)因子ALP、RUNX2基因表達(dá)水平。
1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析通過SPSS17.0軟件，運(yùn)用one-wayANOVA分析各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果數(shù)據(jù)按x_±s的形式表示，P<0.05為差異有顯著性意義。
2結(jié)果Results
2.1CCK-8篩取脂多糖最佳實(shí)驗(yàn)質(zhì)量濃度及實(shí)驗(yàn)時(shí)間
2.1.1篩取最佳實(shí)驗(yàn)質(zhì)量濃度分別加入0，1，10，20，50mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞24h，各實(shí)驗(yàn)組分別與0mg/L脂多糖組比較，差異有顯著性意義(P<0.05)，當(dāng)質(zhì)量濃度為1mg/L時(shí)細(xì)胞增殖活性少量增加，說明低質(zhì)量濃度脂多糖刺激可能對成骨細(xì)胞增殖起促進(jìn)作用，而當(dāng)質(zhì)量濃度為50mg/L時(shí)細(xì)胞增殖活性降低最明顯，但此時(shí)對細(xì)胞殺傷力較大，為確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，最終確定以20mg/L為最佳實(shí)驗(yàn)質(zhì)量濃度，見圖1A。
2.1.2篩取最佳作用時(shí)間以0，20mg/L脂多糖分別刺激0，24，48h，結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的增殖活性呈降低趨勢，差異有顯著性意義(P<0.05)，且在24h抑制明顯，因此確定最佳實(shí)驗(yàn)時(shí)間24h，見圖1B。
2.2免疫熒光檢測Asxl1的表達(dá)水平免疫熒光結(jié)果顯示Asxl1在MC3T3-E1中有表達(dá);加入脂多糖刺激后，其表達(dá)量明顯降低，見圖2，提示Asxl1基因可能參與炎癥反應(yīng)過程。
2.3脂多糖作用于成骨細(xì)胞后Asxl1mRNA的表達(dá)水平與對照組相比，用20mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞24h后，Asxl1mRNA表達(dá)量明顯降低，差異有顯著性意義(P<0.05)，見圖3。
2.4在脂多糖炎性微環(huán)境中沉默Asxl1基因后MC3T3-E1細(xì)胞增殖活性以及成骨相關(guān)因子ALP、RUNX2基因表達(dá)水平變化轉(zhuǎn)染Asxl1-SiRNA24h后，實(shí)驗(yàn)組分別與陰性對照組、空白對照組相比，MC3T3-E1細(xì)胞的增殖活性均明顯降低，差異有顯著性意義(P<0.05)，見圖4A。轉(zhuǎn)染Asxl1-SiRNA24h后，實(shí)驗(yàn)組分別與陰性對照組、空白對照組相比，Asxl1及成骨細(xì)胞相關(guān)基因ALP和RUNX2mRNA表達(dá)量明顯降低，差異有顯著性意義(P<0.05)，見圖4B。
3討論Discussion
維持骨穩(wěn)定狀態(tài)的機(jī)制較為復(fù)雜，目前已知其不僅與破骨細(xì)胞形成、骨吸收增加相關(guān)，也與成骨細(xì)胞數(shù)目減少、分化受到抑制有密不可分的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)成骨細(xì)胞不僅僅局限于通過促進(jìn)細(xì)胞外骨基質(zhì)的合成、分泌與礦化而實(shí)現(xiàn)新骨的形成[19];它還可積極地調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞與造血干細(xì)胞在體內(nèi)的形成與功能，維持機(jī)體平衡，同時(shí)成骨細(xì)胞也是一種內(nèi)分泌細(xì)胞，影響體內(nèi)能量代謝[20];可參與多條信號通路，例如Wnt/β-Catenin通路和Notch信號通路;ALP和RUNX2是成骨細(xì)胞的主要標(biāo)志性因子，前者可作為成骨早期分化的指標(biāo)，后者是成骨細(xì)胞分化的特異性轉(zhuǎn)錄因子[21-23]。由研究可知，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可向成骨分化，從而形成成骨細(xì)胞[24]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是具備自我更新及多譜系分化潛能的多潛能干細(xì)胞，包括成骨、軟骨、脂肪等的形成[25-27]，其中骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化和成脂分化之間的關(guān)系對于正常的骨穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要[28-29]。
近期有研究顯示Asxl1無效等位基因的缺失可導(dǎo)致多種骨骼發(fā)育缺陷，包括發(fā)育不全、骨礦化密度顯著降低、眶上脊發(fā)育不全等。這種有缺陷的骨骼發(fā)育與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的自我更新受損及譜系調(diào)控偏離相關(guān)，遠(yuǎn)離成骨細(xì)胞分化而傾向成脂細(xì)胞分化[30-31]。Asxl1基因的缺失影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的發(fā)展命運(yùn)，而促進(jìn)骨髓惡性腫瘤的發(fā)展[32]。Asxl1基因突變可導(dǎo)致Bohring-Opitz綜合征，是一種具有發(fā)育遲緩、小頭畸形等特點(diǎn)且死亡率極高的罕見遺傳病[33-34]。Asxl1對于維持骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞正常分化功能及在骨骼發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用，同時(shí)Asxl1可能參與骨破壞過程。當(dāng)骨質(zhì)處于炎性環(huán)境時(shí)，也會(huì)形成骨破壞。據(jù)文獻(xiàn)研究報(bào)道，炎癥環(huán)境可通過產(chǎn)生炎癥因子，從而抑制成骨細(xì)胞的增殖與分化，使得骨平衡遭到破壞，骨質(zhì)缺失，最終形成骨破壞[35-36]。如炎癥因子腫瘤壞死因子α可以降低骨細(xì)胞中膠原的產(chǎn)生、骨鈣素的合成，從而干擾成骨細(xì)胞分化及代謝活性而抑制骨的形成，還能通過抑制Wnt通路，阻斷成骨細(xì)胞接受機(jī)體發(fā)出的形成新骨的信號[37-39];白細(xì)胞介素1可通過誘導(dǎo)基質(zhì)酶的產(chǎn)生以及激活NLRP3炎性體，從而對骨組織產(chǎn)生損傷，破壞骨穩(wěn)態(tài)[40-41]。炎癥導(dǎo)致的骨破壞機(jī)制較為復(fù)雜，仍有待進(jìn)一步研究。實(shí)驗(yàn)將探討Asxl1基因在炎癥微環(huán)境下對成骨細(xì)胞增殖與分化的作用，從而探討Asxl1基因與骨破壞之間的關(guān)系，為根尖周炎骨破壞的研究提供一條新的思路。
相關(guān)論文推薦：關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞不同共培養(yǎng)方式對細(xì)胞增殖與分化的影響
實(shí)驗(yàn)選用脂多糖刺激MC3T3-E1細(xì)胞建立體外炎性微環(huán)境。首先篩取脂多糖最佳質(zhì)量濃度，設(shè)計(jì)0，1，10，20，50mg/L濃度梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，模擬炎性微環(huán)境，在其余條件均相同的情況下刺激細(xì)胞24h，CCK-8結(jié)果顯示脂多糖質(zhì)量濃度為1mg/L時(shí)，細(xì)胞的增殖活性與對照組相比升高，隨著質(zhì)量濃度的增加，細(xì)胞增殖活性逐漸降低，50mg/L脂多糖時(shí)降低最明顯，但此時(shí)炎性環(huán)境對細(xì)胞殺傷力較大，為保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，選擇20mg/L為最佳質(zhì)量濃度，該結(jié)果提示低質(zhì)量濃度脂多糖可能對成骨細(xì)胞起促進(jìn)作用，而隨著脂多糖質(zhì)量濃度的持續(xù)增加細(xì)胞增殖受到抑制，且表現(xiàn)出濃度依賴性;其次篩出脂多糖最佳作用時(shí)間，將實(shí)驗(yàn)分為2組：MC3T3-E1組(僅含細(xì)胞，無脂多糖刺激)和MC3T3-E1+脂多糖組(脂多糖質(zhì)量濃度為20mg/L)，在相同條件下，分別對兩組MC3T3-E1細(xì)胞刺激0，24，48h，CCK-8結(jié)果顯示MC3T3-E1+脂多糖組較對照組的細(xì)胞增殖活性降低，且與刺激48h相比較，刺激24h時(shí)MC3T3-E1細(xì)胞的增殖活性降低較明顯，推測隨著時(shí)間的增長可能有其他信號通路參與其中，調(diào)控MC3T3-E1細(xì)胞增殖。通過檢測脂多糖刺激組與正常對照組細(xì)胞中Asxl1mRNA的表達(dá)，驗(yàn)證Asxl1基因是否受到炎性微環(huán)境的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)脂多糖刺激組Asxl1基因表達(dá)量較正常對照組明顯降低，且免疫熒光結(jié)果也顯示炎性微環(huán)境下Asxl1的表達(dá)量與正常對照組比較有所減少，說明Asxl1可能參與炎癥反應(yīng)過程。
為進(jìn)一步驗(yàn)證Asxl1基因在炎性微環(huán)境中影響成骨細(xì)胞的增殖與分化，實(shí)驗(yàn)通過模擬體外炎癥微環(huán)境，同時(shí)在MC3T3-E1細(xì)胞中沉默Asxl1基因，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與陰性對照組和空白對照組相比，沉默Asxl1基因后成骨相關(guān)基因ALP和RUNX2mRNA的表達(dá)量呈降低趨勢，細(xì)胞增殖活性也降低明顯。結(jié)果表明，通過抑制Asxl1基因能影響骨形成過程，破壞骨穩(wěn)態(tài)。該結(jié)果與ZHANG等[18]學(xué)者研究結(jié)果一致，他們通過在體內(nèi)建立Asxl1基因敲除模型，發(fā)現(xiàn)在不同條件下體內(nèi)模型均表現(xiàn)出不同程度的骨質(zhì)缺失及骨質(zhì)發(fā)育不全。
實(shí)驗(yàn)主要的不足之處：一是未研究Asxl1基因與破骨細(xì)胞之間的關(guān)系，因?yàn)楣欠�(wěn)態(tài)不僅與成骨細(xì)胞有關(guān)，與破骨細(xì)胞也有密切聯(lián)系，只有新骨不斷的形成與舊骨不斷的破壞處于動(dòng)態(tài)平衡時(shí)，骨質(zhì)才能正常代謝;二是實(shí)驗(yàn)未建立小鼠體內(nèi)根尖周炎模型，沒有對Asxl1基因是否通過參與炎癥反應(yīng)過程影響成骨細(xì)胞增殖分化加以驗(yàn)證;三是實(shí)驗(yàn)未進(jìn)行蛋白層面的研究。探討Asxl1基因與根尖周炎骨破壞之間的關(guān)系，可為臨床根治根尖周炎提供靶向基因，但Asxl1基因與根尖周炎骨破壞之間仍有較多問題存在，這將是實(shí)驗(yàn)室繼續(xù)研究的重點(diǎn)與方向。
綜上所述，Asxl1基因參與骨質(zhì)形成過程，在炎癥微環(huán)境下，Asxl1基因的減少可進(jìn)一步抑制成骨細(xì)胞的增殖與分化從而破壞骨穩(wěn)態(tài)，引起骨破壞，導(dǎo)致根尖周炎。但Asxl1基因與根尖周炎骨破壞之間尚存疑點(diǎn)，有待進(jìn)一步研究，從而為根尖周病的防治提供可能的靶向基因。
