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摘 要： 正確認識現在醫藥建設應用的新作用管理方式，文章技師介紹有關醫藥學的論文。在單因素試驗的基礎上,利用正交試驗,對沙棗中黃酮類化合物的提取條件進行了優化,提高了黃酮類化合物的提取效果。其中,對提取結果影響大小依次為:乙醇濃度物料比提取時間提取溫度,
正確認識現在醫藥建設應用的新作用管理方式，文章技師介紹有關醫藥學的論文。在單因素試驗的基礎上,利用正交試驗,對沙棗中黃酮類化合物的提取條件進行了優化,提高了黃酮類化合物的提取效果。其中,對提取結果影響大小依次為:乙醇濃度>物料比>提取時間>提取溫度,最后確定提取沙棗中黃酮類化合物的最佳條件為:乙醇濃度70%,超聲時間30 min,超聲溫度45 ℃,固液比1∶16。
摘要：目的 研究用乙醇為溶劑提取沙棗中黃酮類化合物的最佳工藝條件。方法 采用正交試驗篩選黃酮類化合物的最佳提取條件。結果 此條件下提取率為2.295 mg/g。結論 最佳提取條件為乙醇濃度70%、提取溫度45 ℃、提取時間30 min、料液比1∶16。
關鍵詞：沙棗;黃酮;提取工藝,醫藥學論文
沙棗(Elaeagnusangustifolia L.)是新疆蘊藏量大、耐鹽堿、生長快、易繁殖、藥用價值高的一種荒漠鹽生植物資源,新疆各地均有分布[1]。沙棗黃酮具有降低血清膽固醇、抑制血小板集聚、抗病毒和增強免疫力、清除羥基自由基、治療慢性氣管炎等功效[2-4]。因此,沙棗是一種具有開發利用前景的重要資源。但目前沙棗僅有少部分在民間藥用、食用或初步加工,大部分果和葉成熟后自然落地腐爛廢棄,利用率極低,造成這一寶貴資源的極大浪費。為了提高沙棗中黃酮類化合物的提取率,進而提高這一寶貴資源的應用價值,我們對沙棗中黃酮類化合物的提取工藝進行了研究。
1 材料
沙棗(石河子大學生命科學學院提供);蘆丁對照品(購自中國藥品生物制品檢定所)。亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇等,以上試劑均為分析純。 DL-360A超聲波清洗器(上海之信儀器有限公司);棱光牌722N可見分光光度計(上海精密科學儀器有限公司);電子天平(北京賽多利斯天平有限公司);循環水泵(河南鞏義市英峪予華儀器廠)等。
2 方法
2.1 最大吸收波長的確定
吸取0.2 g/mL的蘆丁對照品溶液1 mL,置于10 mL試管中,加入5%的NaNO2溶液0.3 mL,搖勻,靜置6 min;加入10%的Al(NO3)3溶液0.7 mL,搖勻,靜置6 min;加入10 mol/L的NaOH 溶液5 mL,用體積分數為30%的乙醇定容至刻度,混勻,靜置15 min,以0號管未加樣液的顯色液為對照,在450~560 nm范圍內測定吸光度。結果蘆丁對照品溶液的最大吸收波長為510 nm,在此位置有比較明顯的峰形,因此,本方法采用510 nm測定波長。
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2.2 標準曲線的繪制
試驗采用常規的以蘆丁為標準物的分光光度法測定沙棗中黃酮類化合物[5],準確吸取0.2 mg/mL蘆丁對照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分別置于25 mL的比色管中,依次加入5%NaNO2溶液0.3 mL,搖勻,放置6 min,再加入10%Al(NO3)3溶液0.3 mL,搖勻,放置6 min,最后加入4%NaOH溶液4.0 mL,用70%乙醇定容,搖勻,放置15 min,在510 nm處測定吸光度,采用最小二乘法,得回歸方程為:Y=9.735X-0.011 5,R2=0.999 9。
2.3 樣品含量測定
精確吸取1 mL樣品溶液于25 mL容量瓶中,加1 mL 5%NaNO2溶液,放置6 min,再加1 mL 10%Al(NO3)3溶液,放置6 min,最后加10 mL10%NaOH溶液,用蒸餾水定容放置16 min后,在510 nm處測定吸光度。由回歸方程計算樣品溶液中黃酮類化合物含量[黃酮類化合物含量=CD/W。C為樣品溶液中黃酮類化合物含量(mg/mL),D為樣品溶液稀釋后的總體積(mL),W為沙棗質量(g)]。
2.4 黃酮類化合物提取的單因素試驗
分別稱取粉碎的沙棗2.00 g,以物料比、乙醇濃度、溫度、時間作為考察因素,以黃酮提取率作為指標,進行了如下試驗。
2.4.1 物料比條件的選擇
初步選定乙醇濃度(70%)、溫度(30 ℃)、時間(30 min),在料液比梯度為1∶8、1∶10、1∶12、1∶14、1∶16、1∶18的條件下進行單因素試驗。
2.4.2 乙醇濃度條件的選擇
在“2.4.1”試驗基礎上,選定物料比(1∶16)、溫度(30 ℃)、時間(30 min),在乙醇濃度梯度為40%、50%、60%、70%、80%、90%的條件下進行單因素試驗。
2.4.3 溫度條件的選擇
在“2.4.2”試驗基礎上,選定物料比(1∶16)、時間(30 min)、乙醇濃度(70%),在溫度梯度為25、30、35、40、45、50 ℃的條件下進行單因素試驗。
2.4.4 時間條件的選擇
在“2.4.3”試驗基礎上,選定物料比(1∶16)、溫度(30 ℃)、乙醇濃度(70%),在時間梯度為10、15、20、25、30、35 min的條件下進行單因素試驗。
2.5 正交試驗
根據單因素試驗結果,稱取粉碎的沙棗2.00 g,以物料比(A)、乙醇濃度(B)、提取溫度(C)、提取時間(D)為影響因素,黃酮提取率為判斷指標,選用L9(34)正交表進行正交試驗(每個處理重復3次后取平均值),因素水平設置見表1。 表1 因素水平表(略)
3 結果與討論
3.1 單因素試驗結果與分析
3.1.1 物料比對黃酮類化合物提取率的影響
在1∶8~1∶18范圍內,隨物料比的增大提取量逐漸增大,但是當物料比為1∶14~1∶18時,黃酮類化合物提取量增加緩慢。從浸提效果、減少溶劑用量和降低濃縮負荷等方面綜合考慮,選1∶12、1∶14、1∶16的物料比進行正交試驗。
3.1.2 乙醇濃度對黃酮類化合物提取率的影響
從40%~70%隨濃度的增加提取量逐漸增加,當乙醇濃度為70%時,黃酮類化合物提取量達到最大,之后隨乙醇濃度的增加提取量減少,由此可確定用60%、70%、80%的乙醇進行正交試驗。
3.1.3 溫度對黃酮類化合物提取率的影響
黃酮類化合物提取量隨溫度的增加而增加,但當溫度為40~50 ℃時,黃酮類化合物提取量增加緩慢。由此確定正交試驗的溫度為35、40、45 ℃。
3.1.4 提取時間對黃酮類化合物提取率的影響
隨著提取時間的增加,提取量也增加,當提取時間為10~25 min時,黃酮類化合物提取量增加迅速,25~30 min之間提取量變化不大,由此確定正交試驗的提取時間為20、25、30 min。
3.2 正交試驗結果與分析
試驗結果顯示,最佳提取條件為70%的乙醇,1∶16的物料比,45 ℃的提取溫度,30 min的提取時間,即A3B2C3D3為最佳組合,其中,對提取結果影響大小依次為:乙醇濃度>物料比>提取時間>提取溫度。結果見表2。表2 正交試驗極差分析(略)
3.3 驗證試驗
稱取沙棗20 g,根據篩選得到的最佳提取條件A3B2C3D3進行驗證試驗,結果見表3。驗證試驗表明,在最佳提取條件下,黃酮類化合物提取率均大于正交設計中的提取率,所得結果正確。表3 驗證試驗結果(略)
